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如何正确保存和使用ELISA试剂盒?
一、保存方法
未开封试剂盒
核心组分(如酶标抗体、底物)需按标签温度保存,通常为2-8℃(部分需-20℃)。
TMB显色液、终止液等光敏感试剂需避光保存于4℃。
开封后处理
剩余酶标板需密封并添加干燥剂,保存于-20℃防潮。
分装试剂(如标准品)避免反复冻融,建议按单次用量分装后冻存(-20℃或-70℃)。
特殊注意事项
冻干试剂需用无菌缓冲液溶解,分装后标记保存日期。
不同批号试剂禁止混用,开封后需在保质期内使用。
二、样本处理与保存
血液样本
血清:采集后1000×g离心10分钟分离,避免溶血或脂血干扰。
血浆:使用EDTA/肝素抗凝,3000×g离心30分钟取上清。
保存条件
短期(1周内):2-8℃。
中长期:分装后-20℃(1个月内)或-70℃(6个月内)。
三、实验操作要点
加样与温育
加样角度垂直,避免交叉污染;温育时间需严格按说明书控制。
洗涤与显色
手工洗板需垂直拍干,避免残留液体;显色反应需全程避光。
数据读取
终止反应后立即用酶标仪读取OD值,建议采用四参数拟合分析。
四、常见问题规避
溶血/高脂血:此类样本需离心或过滤后检测。
试剂失效:使用前检查是否变色或沉淀,异常则弃用。
温度控制:所有试剂使用前需平衡至室温(除特殊说明外)。
通过规范保存和操作,可显著提升实验结果的可靠性。
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