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以下是关于植物海藻糖-6-磷酸(T6P)ELISA试剂盒说明书的核心内容整理

更新时间:2025-05-15    点击次数:18

  以下是关于‌植物海藻糖-6-磷酸(T6P)ELISA试剂盒说明书‌的核心内容整理:

  BS-8050 植物海藻糖-6-磷酸(T6P)ELISA试剂盒 必赢线路检测3003

  实验原理‌

  采用双抗体夹心法(或一步夹心法)检测T6P浓度:

  包被抗体‌:微孔板预包被T6P特异性抗体。

  反应体系‌:依次加入样本、标准品和HRP标记检测抗体,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。

  显色与检测‌:TMB底物在HRP催化下显色(蓝色→黄色),450nm波长测定OD值,浓度与吸光度正相关。

  试剂盒组成‌

  组分 96孔配置(示例) 备注

  微孔酶标板 12孔×8条 预包被抗体

  标准品 0.3mL×6管 浓度梯度:0-80 μg/L或0-12 ng/mL

  HRP检测抗体 6mL(或10mL) 需避光保存

  TMB底物(A/B) 各6mL 现配现用

  终止液 6mL(2M硫酸) 显色终止

  20×洗涤缓冲液 25mL 使用前1:20稀释

  样本处理要求‌

  样本类型‌:植物组织匀浆、细胞上清液等,避免含叠氮钠(HRP抑制剂)。

  预处理‌:1000×g离心20分钟取上清,分装后-20℃保存,避免反复冻融。

  操作步骤‌

  平衡试剂‌:使用前室温平衡20分钟,预冷组分需溶解。

  加样与孵育‌:

  标准品孔加入梯度浓度标准品,样本孔加入待测液(建议复孔)。

  37℃孵育60分钟,洗板5次(手工或自动洗板机)。

  显色与终止‌:

  每孔加入TMB底物,避光反应15分钟。

  加入终止液后15分钟内测定OD450值。

  注意事项‌

  质量控制‌:S0标准品作为阴性对照,样本浓度需乘以稀释倍数。

  保存条件‌:未使用板条需密封保存于4℃,试剂盒有效期通常为6个月(2-8℃)。

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