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如何验证连盖八连管与仪器的适配性?

更新时间:2025-05-16    点击次数:568

  如何验证连盖八连管与仪器的适配性?

以下是验证连盖八连管(0.1ml/0.2ml)与PCR仪器适配性的标准化流程:

一、物理适配性检测

尺寸匹配测试‌

将八连管插入仪器加热模块,观察是否贴合无松动

检查管盖闭合状态是否影响仪器热盖压合(尤其矮管设计)

密封性验证‌

加入50μL染色水溶液,运行空载PCR程序后检查液体蒸发量(应<5%)

荧光定量实验需额外测试管盖透光性(平盖光损失率需<1%)

 

 


二、热力学性能测试

温度均一性检测‌

使用热电偶测量各孔实际温度,与设定值偏差应≤0.3℃

推荐程序:95℃ 30秒→60℃ 30秒(循环5次)

升降温速率验证‌

薄壁管(0.1ml)在ABI 7500上应达到4℃/秒升温速率

Roche 480需确认管壁厚度≤0.2mm

三、功能实验验证

标准品扩增测试‌

使用λDNA梯度稀释样本(10⁴-10⁸拷贝/μL)进行qPCR,Ct值CV应<2%

荧光兼容性测试‌

白色管需验证FAM/HEX通道信号强度提升≥15%(对比透明管)

透明管需检测自发荧光背景值(OD450应<0.05)

四、适配性记录表

检测项目 合格标准 备注

物理匹配度 无卡顿/漏液 需测试8连管整体插入

温度均一性 孔间温差≤0.5℃ 建议使用第三方校准仪

扩增效率 90-110% 使用标准曲线验证

(注:不同品牌仪器可能存在特异性要求,如Roche 480需专用矮管设计)以上资料仅供参考,具体请咨询技术老师及供应商。

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