不同ELISA试剂盒的洗涤要求有何不同?

　　不同ELISA试剂盒的洗涤要求有何不同?

　　不同ELISA试剂盒的洗涤要求存在显著差异，主要体现在以下关键参数上：

　　一、洗涤次数差异

　　夹心法ELISA‌

　　通常需5-6次洗涤(如试剂盒要求孵育后洗4-5次)以去除未结合物质，降低背景干扰。

　　竞争法/间接法‌

　　洗涤3-4次即可，过度洗涤易导致抗原-抗体复合物解离(如间接法最后一步仅需DDW洗涤)。

　　二、洗涤液类型与体积

　　试剂盒类型 洗涤液成分 单孔体积要求

　　常规夹心法 含0.05% Tween-20的PBST 300-350μL

　　高灵敏度试剂盒 含0.1% BSA的PBST 400-500μL

　　流水冲洗式试剂盒 纯蒸馏水或自来水 持续冲洗2分钟

　　三、特殊操作要求

　　浸泡时间‌

　　多数试剂盒要求静置1-2分钟(如必赢线路检测3003试剂盒)

　　部分高背景样本需延长至3分钟

　　抽吸方式‌

　　自动化洗板机需设置吸液高度距孔底0.5-1mm

　　手工洗板要求拍干力度均匀，避免垂直猛拍

　　四、关键注意事项

　　封闭后洗涤‌

　　包被后需用PBST洗3-5次，而封闭后通常仅需快速过洗1次。

　　显色前洗涤‌

　　夹心法最后一步洗涤需增至5次(如某试剂盒要求TMB显色前洗5次)。

　　厂商差异提示‌：

　　洗涤液严禁跨品牌混用(如某品牌洗涤液含去垢剂);

　　部分试剂盒要求显色前用蒸馏水终洗。

　　注：以上资料仅供参考，如需完整说明，建议联系供应商获取随货文件。

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