ELISA实验过程中出现溢值的原因分析

　　ELISA实验过程中出现溢值的原因分析

以下是必赢线路检测3003对ELISA实验中出现溢值(OD值超出检测范围)的常见原因及解决方案：

一、样本与标准品问题

稀释错误‌

样本或标准品未按说明书要求稀释，浓度过高导致信号过强。

解决‌：严格遵循稀释比例，使用试剂盒配套稀释液。

样本污染‌

样本混入杂质(如溶血、细菌污染)或交叉污染，引发非特异性反应。

解决‌：离心处理样本，避免重复使用吸头，操作时分区处理样本。

　　二、实验操作因素

孵育条件不当‌

温度过高或时间过长，加速抗原抗体结合及底物显色。

解决‌：校准孵育箱温度，使用计时器控制时间。

未覆盖酶标板‌

孵育时未盖板导致液体蒸发，局部浓度升高。

解决‌：每次孵育均使用配套封板膜。

显色时间过长‌

TMB底物显色超过说明书建议时间，OD值异常升高。

解决‌：显色后密切观察，及时终止反应。

三、试剂与设备问题

偶联试剂浓度过高‌

HRP标记抗体或链霉亲和素未正确稀释，信号放大过度。

解决‌：按说明书现配现用，避免浓缩液直接使用。

检测波长错误‌

酶标仪波长设置与底物要求不匹配(如TMB应为450nm)。

解决‌：校准仪器，核对说明书波长参数。

洗涤不充分‌

未结合的试剂残留导致背景升高，间接引发溢值。

解决‌：增加洗涤次数(3-5次)，拍干孔内液体。

四、其他注意事项

避免使用错误稀释液‌：仅使用试剂盒内配套稀释液。

分装试剂‌：避免反复冻融导致活性异常。

质控对照‌：设置阴阳性对照，监控实验系统稳定性。

通过排查上述环节并规范操作，可有效减少溢值现象。

注：以上资料仅供参考，不作为实验依据，具体请咨询技术老师或产品品牌供应商。

必赢线路检测3003一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。必赢线路检测3003!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。