ELISA实验中不同类型样本的处理方法

　　以下是必赢线路检测3003ELISA实验中不同类型样本处理方法的详细总结，按样本类型分类说明：

　　一、血清样本处理

　　采集与静置‌

　　使用无热原、无内毒素试管采集血液，室温静置1-2小时或4℃过夜使血液凝固。

　　倾斜试管可扩大液面横截面，促进血清分离。

　　离心与保存‌

　　4℃条件下以1000×g离心15-20分钟，收集上清。

　　分装后于-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。

　　注意事项‌

　　避免溶血(红细胞破裂释放过氧化物酶会导致假阳性)。

　　避免细菌污染(内源性HRP干扰结果)。

　　二、血浆样本处理

　　抗凝剂选择‌

　　常用EDTA(2%)、肝素(1%)或柠檬酸钠(3.8%)。

　　抗凝剂与血液比例需严格按说明书要求(如柠檬酸钠1:9)。

　　离心与保存‌

　　采集后30分钟内4℃离心(1000×g，15分钟)。

　　上清分装冻存(-20℃或-80℃)，避免高血脂或溶血样本。

　　三、细胞培养上清处理

　　离心去除杂质‌

　　直接收集上清，4℃条件下以1000×g离心20分钟去除细胞碎片。

　　建议二次离心以提高纯度。

　　保存条件‌

　　分装后-80℃冻存，避免反复冻融。

　　四、组织匀浆处理

　　前处理‌

　　用预冷PBS(0.01M，pH7.4)冲洗组织，去除血液残留。

　　称重后剪碎，按1:9(重量体积比)加入PBS或裂解液。

　　匀浆与离心‌

　　冰浴条件下机械匀浆或超声破碎。

　　4℃条件下以5000-10000×g离心5-10分钟，收集上清。

　　蛋白浓度测定‌

　　使用BCA法测定总蛋白浓度，调整至统一水平后检测。

　　五、其他样本处理

　　尿液‌

　　2-8℃下以1000×g离心15分钟去除杂质。

　　粪便‌

　　PBS重悬后冰上振荡15分钟，5000×g离心5分钟取上清。

　　脑脊液/胸腹水‌

　　直接离心(4000-5000×g，10分钟)后取上清。

　　六、通用注意事项

　　避免反复冻融‌：所有样本分装保存，冻融不超过3次。

　　检测时效‌：-20℃保存样本需在1-6个月内检测，4℃保存样本需1周内完成。

　　污染控制‌：操作全程避免细菌污染及外源性酶干扰(如NaN3抑制HRP活性)。

　　以上方法需结合具体试剂盒说明书调整。

　　注：以上资料仅供参考，完整操作请以实说明为准，不同品牌可能存在细节差异‌。

　　必赢线路检测3003一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。必赢线路检测3003!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。Elisa试剂盒