蛋白激酶G ELISA试剂盒生物活性及测定原理

　　蛋白激酶G ELISA试剂盒生物活性及测定原理

　　以下是必赢线路检测3003技术小编对蛋白激酶G(PKG)ELISA试剂盒的生物活性及测定原理的详细说明：

　　一、蛋白激酶G的生物活性‌

　　激活机制‌

　　PKG作为第二信使cGMP的主要受体，当cGMP结合其调节结构域时，会解除N末端结构域对催化核心的抑制，从而激活酶活性。

　　主要功能‌

　　平滑肌松弛‌：通过激活钙激活钾通道，导致细胞超极化和松弛。

　　细胞增殖与凋亡调控‌：在多种细胞类型中，激活的PKG可抑制增殖或诱导凋亡。

　　其他作用‌：参与血小板功能、精子代谢及核酸合成的调节。

　　亚型差异‌

　　PKG-I型‌：主要位于细胞质，参与多种信号转导。

　　PKG-II型‌：通过肉豆蔻酰化锚定在质膜上，功能与定位相关。

　　二、ELISA测定原理‌

　　双抗体夹心法‌

　　包被阶段‌：抗PKG抗体(捕获抗体)固定在微孔板表面。

　　结合阶段‌：待测样本中的PKG与捕获抗体特异性结合。

　　检测阶段‌：酶标记的抗PKG抗体(检测抗体)形成“抗体-抗原-抗体"复合物。

　　显色阶段‌：酶催化底物(如TMB)产生颜色反应，吸光度与PKG浓度正相关。

　　技术特点‌

　　高灵敏度‌：检测下限可达pg/mL级别。

　　高特异性‌：特异性识别PKG，避免与其他激酶交叉反应。

　　三、实验注意事项‌

　　样本处理‌：避免反复冻融，新鲜样本需充分混匀后检测。

　　标准曲线‌：需使用新鲜配制的标准品溶液，确保准确性。

　　四、试剂盒规格与性能‌

　　规格‌：常见48T/96T，适用于血清、血浆等样本。

　　精密度‌：批内差CV<10%，批间差CV<12%。

　　如需进一步优化实验方案，可参考试剂盒说明书或选择代测服务。

　　注：以上资料仅供参考，具体详情来咨询技术 老师或品牌供应商。

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