ELISA实验样本处理基本步骤

　　ELISA实验样本处理基本步骤

　　一、样本类型与预处理

　　血清样本‌

　　采集后室温静置10-20分钟自然凝固，2000-3000转/分离心20分钟，收集上清液。若保存后出现沉淀，需再次离心‌。

　　避免溶血或脂血样本，高脂血需稀释或超滤处理‌。

　　血浆样本‌

　　使用EDTA、肝素钠或柠檬酸钠抗凝，混合10-20分钟后离心(2000-3000转/分，20分钟)，取上清‌。

　　尿液/胸腹水/脑脊液‌

　　无菌管收集，离心后取上清，沉淀需复离心‌。

　　细胞培养上清‌

　　直接离心(2000-3000转/分，20分钟)收集上清;检测细胞内成分需裂解细胞(如冻融法)后离心‌。

　　组织样本‌

　　称重后加入PBS匀浆，离心取上清，分装后-20℃保存‌。

　　二、关键注意事项

　　保存条件‌

　　短期(1周内)检测可2-8℃保存;长期需分装后-20℃或-80℃冻存，避免反复冻融‌。

　　稀释与干扰‌

　　高浓度样本需预实验确定稀释倍数，避免超出检测范围‌。

　　避免使用含裂解试剂的样本(如RIPA)，可能干扰抗原-抗体结合‌。

　　特殊样本处理‌

　　唾液/粪便‌：需高速离心(4000×g)去除杂质‌。

　　全血‌：抗凝后立即混匀，防止凝固‌。

　　三、操作流程示例

　　样本离心‌：2000-3000转/分，20分钟，4℃或室温(依试剂盒要求)‌。

　　上清分装‌：按单次用量分装，避免反复冻融‌。

　　检测前复检‌：离心去除沉淀，确保样本澄清‌。

　　四、常见问题与解决

　　沉淀处理‌：离心后仍浑浊可过滤(0.22 μm滤膜)或超滤浓缩‌。

　　高背景值‌：检查样本是否溶血或含高浓度脂质，必要时稀释‌。

　　注：仅供科研使用，以上资料供参考，如需具体产品说明请咨询技术老师或品牌供应商。

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