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酶联免疫吸附测定(ELISA)的核心类型与应用比较
以下是酶联免疫吸附测定(ELISA)的核心类型及应用比较,必赢线路检测3003结合技术原理与典型场景分析:
1. 直接ELISA
原理:抗原直接包被于固相载体,酶标一抗直接结合显色。
特点:
优点:步骤少(仅需一抗)、交叉反应风险低。
缺点:信号较弱,每种抗体需单独标记。
应用:
高丰度抗原检测(如病毒颗粒、重组蛋白)。
细菌表面抗原(如LPS)快速筛查。
2. 间接ELISA
原理:未标记一抗结合抗原后,酶标二抗放大信号。
特点:
优点:信号强度提升5-10倍,适合多抗体检测。
缺点:步骤较多,二抗可能引发交叉反应。
应用:
抗体滴度测定。
自身免疫病筛查(如抗核抗体)。
3. 夹心ELISA
原理:双抗体夹心结构(捕获抗体+检测抗体)。
特点:
优点:灵敏度达pg/mL级,特异性强(需双表位)。
缺点:抗原需足够大(≥两个表位),需配对抗体。
应用:
微量蛋白检测(如IL-6、TNF-α)。
肿瘤标志物定量(如CEA、PSA)。
4. 竞争ELISA
原理:样本抗原与标记抗原竞争结合有限抗体,信号与浓度负相关。
特点:
优点:适合小分子(半抗原),基质耐受性好。
缺点:信号与浓度负相关,优化复杂。
应用:
小分子检测(如激素、药物浓度)。
环境污染物(如农药残留)。
类型选择建议
检测目标特性 推荐类型
大分子抗原(>10 kDa) 直接ELISA/夹心ELISA
抗体滴度测定 间接ELISA
低丰度蛋白(pg级) 夹心ELISA
小分子(<1 kDa) 竞争ELISA
如需进一步优化实验设计,可结合样本特性与检测目标选择适配方法。
注:以上仅供参考,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。
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